恩诺沙星试剂盒基于竞争性酶联反应原理，含有恩诺沙星的抗原已经包被于微孔板上，吸附在孔内的药物抗原与被测试的样品中药物竞争性与药物一抗相结合。当样品药物相结合的药物抗体被洗涤去除后，只剩下与微孔内药物相结合的抗体，与经酶标记的二抗相结合，酶底物在酶作用下产生蓝色产物，加酸终止反应，此时蓝色产物就会转化成黄色，在450 nm波长测定其吸收值（OD值）。OD值的大小与样品中恩诺沙星的含量成反比。
警告
实验前请阅读以下文字，以保证获得最佳实验效果。
标准品中含有恩诺沙星，请小心使用。
不要使用过期的试剂盒。
不同批次的试剂盒不要混用，抗体和微孔板具有盒与批次的特异性。确保二抗及二抗稀释液正确配制。
尽量保持室温20-25℃，避免在通风口操作防止温度过低，过热和/或者蒸发。同样的，不要在阳光直射下实验，防止过热及蒸发。在孵育期间，如果工作台温度过低，应该铺垫若干纸巾或者其他物料。
水质量很重要，确保使用蒸馏或者去离子水。
加入样品或者试剂到空的微孔板时，吸嘴靠于微孔接近底部，并保持接触。
孵育时间的计算越规范越好，保持添加标准品的一致性，先添加标准品后添加样品。
从低浓度到高浓度地添加标准品，降低影响标准品曲线质量的风险。
将微孔板置于放有干燥剂的密封袋中，冷藏保存。
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